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目的 優(yōu)化小鼠肺組織冰凍切片制作方法,提高肺組織冰凍切片質(zhì)量,有利于提高免疫熒光染色的 特異性,獲得更準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果。>>>商務(wù)洽談，點此處，在線咨詢

方法 使用 C57BL/ 6 小鼠,分別采用傳統(tǒng)冷凍后固定法、冷凍前固定法、改 良灌注冷凍前固定法 3 種方法制作冰凍切片,經(jīng)免疫熒光染色后使用激光掃描共聚焦熒光顯微鏡觀察肺組織染色 情況。 使用熒光顯微鏡對肺組織切片進行全片掃描,計算單位面積內(nèi)完整氣道數(shù)量。

結(jié)果 傳統(tǒng)冷凍后固定法制 作的小鼠肺組織冰凍切片,肺泡結(jié)構(gòu)破壞,氣道壁斷裂嚴(yán)重,存在非特異性染色;冷凍前固定法制作的小鼠肺組織 切片,肺泡和氣道結(jié)構(gòu)相對完整,但肺泡塌陷,部分氣道結(jié)構(gòu)破壞;改良灌注冷凍前固定法制作的小鼠肺組織切片, 肺泡和氣道結(jié)構(gòu)形態(tài)均完整、清晰,多重免疫熒光染色定位準(zhǔn)確。 改良灌注冷凍前固定法制作的小鼠肺組織冰凍 切片單位面積內(nèi)完整氣道(直徑≥100 μm)數(shù)量高于冷凍前固定法((0. 66±0. 15) / mm 2 vs (0. 33±0. 14) / mm 2 ,P< 0. 05),也顯著高于傳統(tǒng)冷凍后固定法((0. 66±0. 15) / mm 2 vs (0. 02±0. 04) / mm 2 ,P<0. 01)。

結(jié)論 使用改良灌注 冷凍前固定法制作冰凍切片,利于保持小鼠肺組織形態(tài)完整,利于獲得高質(zhì)量的多重免疫熒光染色結(jié)果。

閱讀原文：用于多重免疫熒光染色的小鼠肺組織冰凍切片制備方法優(yōu)化研究.pdf

來源：中國比較醫(yī)學(xué)雜志2024年第1期

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