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摘要:Cre-Lox作為被廣泛使用的條件性基因表達(dá)調(diào)節(jié)系統(tǒng),已經(jīng)逐漸成為大小鼠遺傳學(xué)研究的重要工具。組織/細(xì)胞特異性啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的Cre工具鼠與攜帶LoxP位點(diǎn)的目的基因floxed鼠交配后,Cre-Lox系統(tǒng)開始運(yùn)作,Cre重組酶配合LoxP位點(diǎn)的位置和方向可以引發(fā)兩個(gè)LoxP位點(diǎn)間的序列重組,從而實(shí)現(xiàn)目的基因在特定組織/細(xì)胞中的敲除或敲入。Cre-Lox作為被廣泛使用的條件性基因表達(dá)調(diào)節(jié)系統(tǒng),已經(jīng)逐漸成為大小鼠遺傳學(xué)研究的重要工具。組織/細(xì)胞特異性啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的Cre工具鼠與攜帶LoxP位點(diǎn)的目的基因floxed鼠交配后,Cre-Lox系統(tǒng)開始運(yùn)作,Cre重組酶配合LoxP位點(diǎn)的位置和方向可以引發(fā)兩個(gè)LoxP位點(diǎn)間的序列重組,從而實(shí)現(xiàn)目的基因在特定組織/細(xì)胞中的敲除或敲入。今天,小賽要為大家介紹一款最新上線的精原細(xì)胞特異性工具鼠模型——Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠(產(chǎn)品編號(hào):001536)。
STRA8基因與減數(shù)分裂
STRA8基因編碼雌性和雄性生殖細(xì)胞向減數(shù)分裂過渡所需的減數(shù)分裂誘導(dǎo)劑,該蛋白是減數(shù)分裂啟動(dòng)的關(guān)鍵分子[1-2]。研究表明,STRA8與生殖細(xì)胞特異性因子(MEIOSIN)的結(jié)合可誘導(dǎo)多個(gè)參與調(diào)控減數(shù)分裂的基因轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò),涉及G1-S期轉(zhuǎn)換、DNA復(fù)制和減數(shù)分裂原期I等[3-5]。STRA8蛋白在雌性的胚胎卵巢中表達(dá),在雄性的青春期和成年睪丸中以及減數(shù)分裂前的生精細(xì)胞中表達(dá),有某些A型和B型精原細(xì)胞、前細(xì)線體精母細(xì)胞和早期細(xì)線體精母細(xì)胞在蛋白質(zhì)水平表達(dá),表達(dá)開始于晚期未分化的精原細(xì)胞,并在分化的精原細(xì)胞期間持續(xù)存在[6]。
圖1 STRA8和MEIOSIN在細(xì)胞周期從有絲分裂到減數(shù)分裂的轉(zhuǎn)換過程中發(fā)揮核心作用[4]
Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠
由Stra8基因調(diào)控元件驅(qū)動(dòng)的Cre工具鼠具有出生后、減數(shù)分裂前的雄性生殖細(xì)胞特異性活性,是研究睪丸生殖細(xì)胞發(fā)育的重要工具[6]。賽業(yè)生物利用基因編輯技術(shù)自主研發(fā)構(gòu)建了Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠(產(chǎn)品編號(hào):C001536),該模型在小鼠Stra8基因調(diào)控元件的驅(qū)動(dòng)下表達(dá)Cre重組酶,且不會(huì)影響小鼠內(nèi)源Stra8基因的表達(dá)。當(dāng)該小鼠與含有l(wèi)oxP位點(diǎn)的小鼠雜交時(shí),子代可在精原細(xì)胞中發(fā)生由Cre重組酶介導(dǎo)的loxP位點(diǎn)間的序列重組。
Cre重組酶在精原細(xì)胞中顯著表達(dá)
將Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠與條件性表達(dá)tdTomato熒光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配,其雙基因雜合子代小鼠的精原細(xì)胞中存在大量tdTomato蛋白的紅色熒光信號(hào)。
Cre重組酶在附睪中表達(dá)
將Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠與條件性表達(dá)tdTomato熒光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配,其雙基因雜合子代小鼠的附睪中存在少量tdTomato蛋白的紅色熒光信號(hào)。
總 結(jié)
在Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠模型(產(chǎn)品編號(hào):C001536)中,Cre重組酶的表達(dá)主要集中于精原細(xì)胞,同時(shí)在附睪中也檢測(cè)到部分重組信號(hào)。因此,該模型可用于靶向精原細(xì)胞的組織特異性研究。
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